常见问题
Q
荧光强度过高?1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间 2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性 3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间 2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
细胞分群异常?

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
阻断不充分,更换阻断剂或者增加阻断的时间?

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度?

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性?

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
多种细胞均能表达靶抗原?

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
请查阅文献,确认有关靶抗原表达的信息?

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
死细胞,粘连体,碎片引起

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。

Q
在实验之前将细胞用过滤器去除团块,加入活性染料

1. 阻断不充分。更换阻断剂或者增加阻断的时间

2. 抗体浓度过高。通过滴定抗体以确定最佳浓度;设置阳性和阴性对照以验证抗体的特异性

3. 洗涤不充分。适当增加洗涤 次数,如果是胞内靶标,可以在洗涤缓冲液中加入Tween-20或Triton-X,以确保未结合的抗体不会被困在细胞内。